自體脂肪源性干細胞輔助脂肪移植治療面部凹陷畸形
?術前準備
術前簽署知情同意書，標記需治療的畸形范圍，標準照相存檔；采用美容石膏面膜或橡皮泥塑形排水法估計軟組織缺損量。
ADSCs的獲取與分離
常規吸脂或切脂取材，以100ml純脂肪量為1個單位治療劑量，根據軟組織缺損程度，決定單位治療劑量數，即刻送干細胞分離室進行脂肪干細胞消化、分離、提取。
ADSCs提取程序：脂肪組織混合物以生理鹽水清洗，加入無菌膠原酶液，充分振蕩混勻，恒溫振蕩箱內消化、離心。離心后液體，由上至下分為脂肪層、生理鹽水層、沉淀層(含干細胞成分)，將沉淀層篩網過濾后，加入適量生理鹽水。應用淋巴細胞分離液以梯度離心法進一步分離、純化干細胞。在新的離心管中加入淋巴細胞分離液30ml，將細胞懸液貼壁緩緩加入淋巴細胞分離液上層，可見懸液與淋巴細胞分離液之間清晰界面。離心1000r／min，15min，可見液體分為生理鹽水層、單核細胞分離液層、紅細胞沉淀層。用細移液管吸取單核細胞分離液層，加入另一新離心管當中。向離心管中加入生理鹽水，離心洗滌3次(1000r／min，5min)。將上述步驟提取的含ADSCs的單個核細胞懸浮于生理鹽水中，采用活細胞計數儀計數，通常細胞濃度在（2～20）×107/ml，備用。每次分離后，另取少量細胞進行臺盼藍染色檢測活細胞比率，并常規行細菌培養。
顆粒脂肪組織純化：將剩余脂肪組織混合物以生理鹽水漂洗、離心。離心后的液體由上至下分為油脂層、脂肪層、生理鹽水層、沉淀層(含大量血細胞成分)。收集脂肪層加入等量生理鹽水，混勻，離心。離心液體由上至下分為脂肪層、生理鹽水層、沉淀層。收集脂肪層中顆粒脂肪組織，備用。
CAL移植物形成：將含有ADSCs懸液與顆粒脂肪組織混合，靜置30min，使ADSCs與顆粒脂肪充分附著，形成CAL移植物。
CAL操作
受區皮下脂肪層行局部浸潤麻醉或區域阻滯麻醉。取隱蔽或微創切口，使切口相互垂直，皮下脂肪層分離疏松網格狀隧道；層次在皮下脂肪與顴、頰纖維脂肪墊間，瞼周、口周受區分離方向盡量保持與血管、神經平行；受區分離時，注意勿分離過淺，以免造成術后凹凸不平；分離勿深及肌肉層，以防損傷或壓迫面神經。受區處理完畢后，應用螺旋推進注射器在受區均勻推注，切勿粗暴高壓注射，注意中央部位與邊緣部位之間平滑過渡，其中央部位應適當多填充，盡量使移植物均勻分布于凹陷部位。對特殊細微部位可行多層面、多隧道、多點注射, 受植床應盡量選擇血運良好的組織層面。注射完畢后，拔出針頭，壓住針孔(若有切口應縫合),并輕輕揉壓注射部位，撫平受區，局部塑形包扎，壓力應適度。
術后處理
受區制動1周，減少或避免移植區周圍肌肉的活動，防止移植脂肪中新生血管的損傷；術后3個月內，面部避免陽光曝曬和局部按摩。術后定期隨訪、照相，與術前進行對比。評價標準分為完美效果（癥狀完全消失）、明顯改善(原有癥狀消失或明顯減輕)、有效(原有癥狀部分消失，需重復治療)和無效(原有癥狀無變化)。評價結果的標準包括表情是否自然,以及患者自我感覺舒適度等。B超、MRI檢查有無硬結、皮下包塊、囊腫、壞死變性等并發癥。患者主觀評價：定期隨訪，評價標準分為滿意(自覺改善明顯，效果持久)、有效(自覺有部分改善)、不滿意(自覺無明顯改善或改善維持時間過短)。
ADSCs是存在于脂肪組織中的間充質干細胞,具有多向分化的潛能。其優點：①脂肪組織儲量豐富，來源充足，取材量大，能反復取材；②組織獲取可通過吸脂術等方法完成，不會給患者造成二次損傷；③脂肪組織中干細胞含量豐富，高于骨髓中干細胞500倍；④屬自體移植，無免疫排斥反應；⑤不涉及醫學倫理學問題。因此，ADSCs成為組織再生和修復的理想細胞來源。但干細胞單純移植時，絕大多數都被單核巨噬細胞吞噬，只有約10%的干細胞能存活下來，因此，低下的存活率成為限制其療效的關鍵。有研究表明，將ADSCs與成熟脂肪細胞共同培養時，可以出現向脂肪細胞分化。Matsumoto等認為，缺乏干細胞的游離脂肪組織，在移植后產生的脂肪吸收、細胞凋亡等現象，可通過增加其中的ADSCs數目來改善，并提出了ADSCs輔助CAL的理論。該技術的優點：①ADSCs作為脂肪細胞貯備能直接轉化為脂肪細胞，進而形成脂肪組織，以補償部分成熟脂肪細胞的逐漸吸收；②直接轉化成為內皮細胞，促進再血管化，從而增加移植組織的血供，降低移植物的吸收率；③ADSCs產生和分泌多種促血管化的細胞因子，誘導血管再生；④減少缺血再灌注損傷，保護移植物；⑤促進受區傷口愈合。臨床上，CAL技術已應用于部分乳房切除術后乳房再造、隆乳以及半側顏面萎縮的治療，效果理想。
研究證實，ADSCs在移植術后2個月，其活性明顯增強，臨床修復效果會在術后3個月后更明顯，所以，術后療效觀察時限應延長至半年，根據患者的術后恢復情況，決定是否行再次治療，序貫治療間隔時限至少為6個月。本研究的欠缺點在于病例的樣本量較少，缺乏更為客觀的組織學證據，因此，ADSCs的蕞佳治療濃度尚需探討。
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